商品詳情
【培養(yǎng)條件】
IMDM(CellCook cat:CM2011,或同配方)10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC1901G)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比);維持細(xì)胞密度在1*10^5-1*10^6cells/ml
【傳代方式】
離心收集(1000rpm,5分鐘)
【換液頻率】
每周換液2-3次
【凍存液配方】
RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
【難度等級(jí)】
++
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
需控制細(xì)胞密度,靜置培養(yǎng)后細(xì)胞會(huì)貼附
【特征特性】
該細(xì)胞是由Lozzio從一名53歲的慢性髓細(xì)胞性白血病急變期的女性患者的胸水中分離建立的。該細(xì)胞曾被認(rèn)為來(lái)源于粒系,處于高度未分化階段;Anderson等人作了細(xì)胞膜特性的研究后,認(rèn)為該細(xì)胞是紅白血病細(xì)胞系。該細(xì)胞是對(duì)自然殺傷細(xì)胞高度敏感的體外靶標(biāo),故而被廣泛應(yīng)用于這方面的研究。K562的原始細(xì)胞是一種具有多向分化潛能的造血系統(tǒng)的惡性腫瘤細(xì)胞,能自發(fā)分化為紅系、粒系和單核系的可辨識(shí)的祖細(xì)胞。該細(xì)胞表達(dá)CD7(25%)
藥篩:通過(guò)慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測(cè)。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過(guò)程中定期(一個(gè)月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過(guò)程中每天都加藥。