商品詳情
【培養(yǎng)條件】
DMEM/F12(CellCook cat:CM2012,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC9007G)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比),先收集懸浮型細(xì)胞,再對(duì)貼壁型細(xì)胞進(jìn)行消化,收集。
【傳代方式】
懸浮部分離心收集(1000rpm,5min),貼壁部分消化1-2分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
DMEM/F12 +10%FBS+10%DMSO
【難度等級(jí)】
++
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
懸浮與貼壁混合,需要將培養(yǎng)基中的懸浮細(xì)胞與消化完成的貼壁細(xì)胞一并離心收集再做傳代
【特征特性】
源于C57BL/6小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,表達(dá)核v-myc、染色體v-raf 癌基因,表面表達(dá)env gp70抗原,在形態(tài)學(xué)、表型及功能上有吞噬細(xì)胞的特征。
藥篩:通過(guò)慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測(cè)。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過(guò)程中定期(一個(gè)月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過(guò)程中每天都加藥。