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RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:4傳代（培養(yǎng)面積比）

消化6-10分鐘（培養(yǎng)箱消化）

每周換液2-3次

RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO

4T1是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌呤抗性細(xì)胞株。當(dāng)注射到BALB/c小鼠中時，4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉(zhuǎn)移腫瘤，可轉(zhuǎn)移到肺，肝，淋巴結(jié)和大腦，同時在注射部位形成始發(fā)灶。誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移時不需要摘除始發(fā)灶。4T1細(xì)胞在BALB/c小鼠中的生長與轉(zhuǎn)移特性與人體中的乳腺癌十分相近。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動物模型。4T1誘導(dǎo)的腫瘤在手術(shù)后及未手術(shù)情況下轉(zhuǎn)移的動力學(xué)相近，可以用作手術(shù)后及未手術(shù)模型。跟其他腫瘤模型相比，由于4T1的抗6-硫鳥嘌呤特性，微小的轉(zhuǎn)移細(xì)胞團(tuán)(少到僅僅1個)也可在遠(yuǎn)距離組織中檢測出來，比大部分腫瘤模型都更加準(zhǔn)確，因為不需要數(shù)結(jié)節(jié)數(shù)或者稱量靶標(biāo)組織重量。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察，標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期（一個月2-3次或頻率自定）用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選，凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次，不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。