商品詳情
【培養(yǎng)條件】
DMEM(改良型)(CellCook cat:CM2007,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC9044G)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
懸浮部分離心收集(1000rpm,5分鐘),貼壁部分消化2-3分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
DMEM(改良型)+10%FBS+10%DMSO
【難度等級】
+
【培養(yǎng)要點】
懸浮與貼壁混合,需要將培養(yǎng)基中的懸浮細(xì)胞與消化完成的貼壁細(xì)胞一并離心收集再做傳代
【特征特性】
細(xì)胞對1,3-bis-(2-chloroethyl)-1-nitrosourea耐藥但對甲氨蝶呤敏感。有文章報道細(xì)胞有高致瘤性,但在鼠中低轉(zhuǎn)移。培養(yǎng)皿中會堆疊生長而不完全匯合。鼠痘病毒陰性。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強細(xì)胞熒光表達(dá)量可進行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期(一個月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。