商品詳情
【培養(yǎng)條件】
McCoy's 5a(CellCook cat:CM2002,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
McCoy's 5a(CellCook cat:CM2002,或同配方)
血清:
南美胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
【傳代比例】
不高于1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化3-5分鐘
【換液頻率】
每周換液2-3次
【凍存液配方】
MCCOY'S 5A+10%FBS+10%DMSO
【難度等級(jí)】
++
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
完全攤開(kāi)需1天
【特征特性】
這株細(xì)胞是1970年由TREMPE G和OLD LJ從一位43歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到的。該細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒、肝糖原顆粒、大溶酶體、成束的細(xì)胞質(zhì)纖絲;過(guò)表達(dá)HER2/C-ERB-2基因產(chǎn)物。
藥篩:通過(guò)慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測(cè)。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過(guò)程中定期(一個(gè)月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過(guò)程中每天都加藥。