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DMEM(改良型)(CellCook cat:CM2007) 10%新生牛血清

1:3傳代（培養(yǎng)面積比）；當(dāng)細胞生長至80%或80%以下匯合時即可傳 代，切勿達到匯合

消化3-4分鐘

每周換液兩次

DMEM(改良型)+10%新生牛血清+10%DMSO

NIH/3T3是從NIH Swiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸性抑制的連續(xù)傳代細胞株。為了培育在形態(tài)學(xué)特征上更適合于進行轉(zhuǎn)化分析的亞株，建立的NIH/3T3細胞株又進行了5輪以上亞克隆。該細胞株對肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，對DNA轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。

藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進細胞基因組，使細胞表達熒光蛋白，在熒光顯微鏡下可以進行觀察，標(biāo)記后的細胞非常容易進行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細胞熒光表達量的不確定性，為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期（一個月2-3次或頻率自定）用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選，凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次，不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。