商品詳情
【培養(yǎng)條件】
MEM(CellCook cat:CM2015,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別) 添加劑:1X 非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC0101L)
【傳代比例】
1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化5分鐘
【換液頻率】
每周換液兩次。
【凍存液配方】
MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO
【難度等級】
+++
【培養(yǎng)要點】
細胞有堆疊生長特性,消化后需兩天貼壁至完全攤開。
【特征特性】
該細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白;表達胰島素受體和胰島素樣生長。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合進細胞基因組,使細胞表達熒光蛋白,常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導致細胞熒光表達量的不確定性,為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細胞篩選頻率為1-2個月,篩選時,將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時間為一周,嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細胞,復蘇后第二代待細胞狀態(tài)穩(wěn)定時,可進行篩選,維持陽性細胞比例。篩選過程中,建議不要使用細胞做實驗,抗生素會影響部分實驗結(jié)果。