商品詳情
【培養(yǎng)條件】
DMEM,high glucose(CellCook cat:CM2016,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC0108L)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化3分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
DMEM,high glucose+10%FBS+10%DMSO
【難度等級(jí)】
+
【特征特性】
從MHCC97-H細(xì)胞系克隆出的兩株細(xì)胞的高轉(zhuǎn)移株,其肺轉(zhuǎn)移率為100%。
藥篩:通過(guò)慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像實(shí)驗(yàn)和啟動(dòng)子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。
熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為 1~2 個(gè)月,篩選時(shí),將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細(xì)胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時(shí)間為一周,嘌呤霉素終濃度為 4 μg/mL。長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞,復(fù)蘇后第二代待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定時(shí),可進(jìn)行篩選,維持陽(yáng)性細(xì)胞比例。篩選過(guò)程中,建議不要使用細(xì)胞做實(shí)驗(yàn),抗生素會(huì)影響部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果。