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MEM(CellCook cat:CM2015,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別) 添加劑:1X 非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L)

1:4傳代（培養(yǎng)面積比）

消化2-3分鐘

2~3天換液1次

MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO

HeLa是第一個來自人體組織經(jīng)連續(xù)培養(yǎng)獲得的非整倍體上皮樣細胞系，它由Gey GO等在1951年從31歲女性黑人的宮頸癌組織建立。經(jīng)原始組織切片重新觀察，Jones等將其診斷為腺癌。已知該細胞系含有人乳頭狀瘤病毒HPV18序列，需在2級生物安全防護臺操作。該細胞角蛋白陽性，p53表達量較低，但表達正常水平的pRB（視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制因子）。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶（Luciferase,Luc）的基因片段整合進細胞基因組，使細胞表達熒光蛋白，常用于構建各類皮下、原位或轉移型的CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病毒轉染的方式，導致細胞熒光表達量的不確定性，為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細胞篩選頻率為1-2個月，篩選時，將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中，細胞正常培養(yǎng)傳代即可，每次篩選時間為一周，嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細胞，復蘇后第二代待細胞狀態(tài)穩(wěn)定時，可進行篩選，維持陽性細胞比例。篩選過程中，建議不要使用細胞做實驗，抗生素會影響部分實驗結果。