商品詳情
【培養(yǎng)條件】
DMEM,high glucose(CellCook cat:CM2016,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC1801L)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化3-4分鐘
【換液頻率】
每周換液2-3次
【凍存液配方】
DMEM,high glucose+10%FBS+10%DMSO
【難度等級】
+
【培養(yǎng)要點】
暫無
【特征特性】
A375源自一位54歲女性,是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤,在瓊脂上形成克隆。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合進細胞基因組,使細胞表達熒光蛋白,常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導致細胞熒光表達量的不確定性,為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細胞篩選頻率為1-2個月,篩選時,將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時間為一周,嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細胞,復(fù)蘇后第二代待細胞狀態(tài)穩(wěn)定時,可進行篩選,維持陽性細胞比例。篩選過程中,建議不要使用細胞做實驗,抗生素會影響部分實驗結(jié)果。