商品詳情
【培養(yǎng)條件】
DMEM,high glucose(CellCook cat:CM2016,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC9009L)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化3分鐘
【換液頻率】
3-4天換液一次
【凍存液配方】
DMEM,high glucose+10%FBS+10%DMSO
【難度等級】
+
【培養(yǎng)要點】
暫無
【特征特性】
此細胞株源自C57/L小鼠中引發(fā)的BW7756肝癌;表達AFP、α1抗胰蛋白酶、淀粉酶;鼠痘病毒陰性。此細胞可以在無血清的培養(yǎng)基中繁殖,培養(yǎng)基成分是:DMEM,75%; Waymouth’s MAB 87/3培養(yǎng)基,25%。添加3x10-8M硒。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合進細胞基因組,使細胞表達熒光蛋白,常用于構建各類皮下、原位或轉移型的CDX腫瘤模型、活體動物體內光學成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病毒轉染的方式,導致細胞熒光表達量的不確定性,為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細胞篩選頻率為1-2個月,篩選時,將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時間為一周,嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細胞,復蘇后第二代待細胞狀態(tài)穩(wěn)定時,可進行篩選,維持陽性細胞比例。篩選過程中,建議不要使用細胞做實驗,抗生素會影響部分實驗結果。