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RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)

1:4傳代（培養(yǎng)面積比）

消化6-10分鐘（培養(yǎng)箱消化）

每周換液2-3次

RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO

4T1是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥(niǎo)嘌呤抗性細(xì)胞株。當(dāng)注射到BALB/c小鼠中時(shí)，4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉(zhuǎn)移腫瘤，可轉(zhuǎn)移到肺，肝，淋巴結(jié)和大腦，同時(shí)在注射部位形成始發(fā)灶。誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移時(shí)不需要摘除始發(fā)灶。4T1細(xì)胞在BALB/c小鼠中的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移特性與人體中的乳腺癌十分相近。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動(dòng)物模型。4T1誘導(dǎo)的腫瘤在手術(shù)后及未手術(shù)情況下轉(zhuǎn)移的動(dòng)力學(xué)相近，可以用作手術(shù)后及未手術(shù)模型。跟其他腫瘤模型相比，由于4T1的抗6-硫鳥(niǎo)嘌呤特性，微小的轉(zhuǎn)移細(xì)胞團(tuán)(少到僅僅1個(gè))也可在遠(yuǎn)距離組織中檢測(cè)出來(lái)，比大
部分腫瘤模型都更加準(zhǔn)確，因?yàn)椴恍枰獢?shù)結(jié)節(jié)數(shù)或者稱量靶標(biāo)組織重量。
藥篩：通過(guò)慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶（Luciferase,Luc）的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像實(shí)驗(yàn)和啟動(dòng)子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為1-2個(gè)月，篩選時(shí)，將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中，細(xì)胞正常培養(yǎng)傳代即可，每次篩選時(shí)間為一周，嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞，復(fù)蘇后第二代待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)，可進(jìn)行篩選，維持陽(yáng)性細(xì)胞比例。篩選過(guò)程中，建議不要使用細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)，抗生素會(huì)影響部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果。