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DMEM(改良型)(CellCook cat:CM2007,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)

1:3傳代（培養(yǎng)面積比）

懸浮部分離心收集(1000rpm,5分鐘)，貼壁部分消化2-3分鐘

2~3天換液1次

DMEM(改良型)+10%FBS+10%DMSO

細(xì)胞對(duì)1,3-bis-(2-chloroethyl)-1-nitrosourea耐藥但對(duì)甲氨蝶呤敏感。有文章報(bào)道細(xì)胞有高致瘤性，但在鼠中低轉(zhuǎn)移。培養(yǎng)皿中會(huì)堆疊生長(zhǎng)而不完全匯合。鼠痘病毒陰性。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶（Luciferase,Luc）的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像實(shí)驗(yàn)和啟動(dòng)子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為1-2個(gè)月，篩選時(shí)，將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中，細(xì)胞正常培養(yǎng)傳代即可，每次篩選時(shí)間為一周，嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞，復(fù)蘇后第二代待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)，可進(jìn)行篩選，維持陽(yáng)性細(xì)胞比例。篩選過程中，建議不要使用細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)，抗生素會(huì)影響部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果。