商品詳情
【培養(yǎng)條件】
DMEM,high glucose(CellCook cat:CM2016,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC9098L)
【傳代比例】
1:2-1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化2-3分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
DMEM,high glucose+10%FBS+10%DMSO
【難度等級】
++
【培養(yǎng)要點】
細(xì)胞有密度依賴,密度低時細(xì)胞生長緩慢
【特征特性】
抗原表達(dá):CD31陽性;產(chǎn)物:八因子、整合唾液酸蛋白(BSP)、biglyan、decorrin、villin2(ezrin)。骨唾液酸蛋白,biglyan,decorrin和osteopontin的表達(dá)顯示其骨家族細(xì)胞特性。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學(xué)成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為1-2個月,篩選時,將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細(xì)胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時間為一周,嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細(xì)胞,復(fù)蘇后第二代待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定時,可進(jìn)行篩選,維持陽性細(xì)胞比例。篩選過程中,建議不要使用細(xì)胞做實驗,抗生素會影響部分實驗結(jié)果。