商品詳情
【培養(yǎng)條件】
IMDM(CellCook cat:CM2011,或同配方)10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC9099L)
【傳代比例】
維持細(xì)胞密度在1*10^5-2*10^6cells/ml
【傳代方式】
1:3傳代,離心收集(1000rpm,5分鐘)
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
【難度等級(jí)】
+
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
嚴(yán)格控制細(xì)胞密度,密度較高時(shí)容易產(chǎn)生大量細(xì)胞碎片
【特征特性】
該細(xì)胞能引起具有人類骨髓瘤骨病特征的小鼠溶骨性骨病變。細(xì)胞系產(chǎn)生白介素-6,但生長(zhǎng)不依賴于外源性白介素-6。靜脈注射培養(yǎng)細(xì)胞的小鼠與靜脈注射新鮮骨髓源性骨髓瘤細(xì)胞的小鼠發(fā)生相同的疾病,包括單克隆免疫球蛋白病和放射性骨病變。鼠痘病毒陰性。
藥篩:通過(guò)慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像實(shí)驗(yàn)和啟動(dòng)子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為1-2個(gè)月,篩選時(shí),將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細(xì)胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時(shí)間為一周,嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞,復(fù)蘇后第二代待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定時(shí),可進(jìn)行篩選,維持陽(yáng)性細(xì)胞比例。篩選過(guò)程中,建議不要使用細(xì)胞做實(shí)驗(yàn),抗生素會(huì)影響部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果。