商品詳情
【培養(yǎng)條件】
RPMI 1640(改良型)(CellCook cat:CM2006,或同配方) 10%澳洲胎牛血清(CellCook cat:CM1003L)
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC1608M)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
離心收集(1000rpm,5分鐘)
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
RPMI 1640(改良型)+10%澳洲胎牛血清+10%DMSO
【難度等級】
++
【培養(yǎng)要點】
維持高密度有利于細胞生長,靜置培養(yǎng)后細胞會貼附
【特征特性】
來源于一位61歲的男性漿細胞瘤患者;可產(chǎn)生免疫球蛋白輕鏈,未檢
測到重鏈。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合
進細胞基因組,使細胞表達熒光蛋白,常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的
CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學(xué)成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病
毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細胞熒光表達量的不確定性,為增強細胞熒光表達量可進行
抗性篩選。
熒光株培養(yǎng)條件與野生型細胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細胞篩選頻率為1-2個月,篩
選時,將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時間
為一周,嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細胞,復(fù)蘇后第二代待細胞狀
態(tài)穩(wěn)定時,可進行篩選,維持陽性細胞比例。篩選過程中,建議不要使用細胞做
實驗,抗生素會影響部分實驗結(jié)果。
【STR位點信息】