商品詳情
【培養(yǎng)條件】
RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC1928LM)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比);維持細胞濃度在0.5*10^6- 1.5*10^6cells/ml
【傳代方式】
離心收集(1000rpm,5分鐘)
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
【難度等級】
++
【培養(yǎng)要點】
需控制細胞密度
【特征特性】
該細胞從一位19歲男性患者的外周血中分離建系。該細胞CD24陽
性,可與CD24陰性細胞N6/ADR成對,用于CD24的功能研究。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合
進細胞基因組,使細胞表達熒光蛋白,常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的
CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學(xué)成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病
毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細胞熒光表達量的不確定性,為增強細胞熒光表達量可進行
抗性篩選。
熒光株培養(yǎng)條件與野生型細胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細胞篩選頻率為1-2個月,篩
選時,將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時間
為一周,嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細胞,復(fù)蘇后第二代待細胞狀
態(tài)穩(wěn)定時,可進行篩選,維持陽性細胞比例。篩選過程中,建議不要使用細胞做
實驗,抗生素會影響部分實驗結(jié)果。
【STR位點信息】