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RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:3-1:5傳代（培養(yǎng)面積比）

消化2-3分鐘

每周換液2-3次

RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO

從一例原位脈絡(luò)膜黑色素瘤病例中分離建系。該細(xì)胞是ESTDAB計劃中收集的超過170株黑色素瘤細(xì)胞中的一株。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶（Luciferase,Luc）的基因片段整合
進(jìn)細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的
CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學(xué)成像實(shí)驗(yàn)和啟動子活性分析等。由于是用慢病
毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行
抗性篩選。
熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為1-2個月，篩
選時，將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中，細(xì)胞正常培養(yǎng)傳代即可，每次篩選時間
為一周，嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細(xì)胞，復(fù)蘇后第二代待細(xì)胞狀
態(tài)穩(wěn)定時，可進(jìn)行篩選，維持陽性細(xì)胞比例。篩選過程中，建議不要使用細(xì)胞做
實(shí)驗(yàn)，抗生素會影響部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果。