商品詳情
【培養(yǎng)條件】
MEM(CellCook cat:CM2015,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別) 添加劑:1X 非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC0101R)
【傳代比例】
1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化5分鐘
【換液頻率】
每周換液兩次。
【凍存液配方】
MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO
【難度等級】
+++
【培養(yǎng)要點】
細(xì)胞有堆疊生長特性,消化后需兩天貼壁至完全攤開。
【特征特性】
該細(xì)胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細(xì)胞表達(dá)甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、纖溶酶原、補(bǔ)體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白;表達(dá)胰島素受體和胰島素樣生長。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。
正常培養(yǎng)過程中定期(一個月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。