99久久婷婷综合国产青草_午夜视频免费看毛片_日韩精品欧美一级在线视频_了解最新欧美视频在线免费看_在线视频国偷自产_亚洲精品粉嫩小泬20p_4399国语在线观看视频_777奇米四色眼影九色_无码av秘 一区二区三区软件_久久久亚洲天堂中文字幕

MEM(CellCook cat:CM2015,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別) 添加劑:10ug/ml胰島素(CellCook cat:CM1007)，1X 非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L)

不高于1:3傳代（培養(yǎng)面積比）

消化3-5分鐘

每周換液2-3次

MEM+10%FBS+10ug/ml胰島素+1X 非必需氨基酸+10%DMSO

該細(xì)胞是從一名69歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離建立的。該細(xì)胞保留了多個(gè)分化乳腺上皮的特性，包括：能通過胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成隆突結(jié)構(gòu)（domes）；該細(xì)胞表達(dá)WNT7B癌基因；TNF-α可以抑制MCF-7細(xì)胞的生長；抗雌激素處理能調(diào)節(jié)細(xì)胞胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白（IGFBP）的分泌。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察，標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期（一個(gè)月2-3次或頻率自定）用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選，凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次，不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。