商品詳情
【培養(yǎng)條件】
RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%澳洲胎牛血清(CellCook cat:CM1003L) 添加劑:1ug/ml胰島素(CellCook cat:CM1007)
【推薦培養(yǎng)試劑】
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
RPMI 1640(CellCook: CM2017或同配方)
血清:
澳洲胎牛血清(CellCook cat:CM1003L)
添加劑:
1ug/ml胰島素(CellCook cat:CM1007)
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC0315R)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化2-3分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
RPMI 1640+10%澳洲胎牛血清+1ug/ml胰島素+10%DMSO
【難度等級(jí)】
++
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
建議使用澳洲胎牛血清級(jí)別血清培養(yǎng)
【特征特性】
該細(xì)胞1978年由W.G. Coutinho 和 E.Y. Lasfargues建系,源自一位72歲患有乳腺導(dǎo)管癌的白人女性,來源組織包括乳頭及浸潤(rùn)導(dǎo)管。該細(xì)胞形態(tài)包括上皮樣細(xì)胞及多核巨細(xì)胞,可分泌一種粘性物質(zhì)。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測(cè)。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期(一個(gè)月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。