商品詳情
【培養(yǎng)條件】
MEM(CellCook cat:CM2015,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別) 添加劑:1X 非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC1101R)
【傳代比例】
1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化2-3分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO
【難度等級(jí)】
+
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
暫無(wú)
【特征特性】
HeLa是第一個(gè)來(lái)自人體組織經(jīng)連續(xù)培養(yǎng)獲得的非整倍體上皮樣細(xì)胞系,它由Gey GO等在1951年從31歲女性黑人的宮頸癌組織建立。經(jīng)原始組織切片重新觀察,Jones等將其診斷為腺癌。已知該細(xì)胞系含有人乳頭狀瘤病毒HPV18序列,需在2級(jí)生物安全防護(hù)臺(tái)操作。該細(xì)胞角蛋白陽(yáng)性,p53表達(dá)量較低,但表達(dá)正常水平的pRB(視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制因子)。
藥篩:通過(guò)慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測(cè)。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過(guò)程中定期(一個(gè)月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過(guò)程中每天都加藥。