商品詳情
【培養(yǎng)條件】
RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
離心收集(1000RPM,5分鐘)
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
【難度等級(jí)】
++
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
需控制細(xì)胞密度
【特征特性】
RAJI細(xì)胞由PULVERTAFT RJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的BURKITT淋巴瘤中分離建立的,是第一個(gè)人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細(xì)胞,為B細(xì)胞起源。該細(xì)胞中含有EBV,需要在二級(jí)生物安全柜中操作;可作轉(zhuǎn)染宿主。
藥篩:通過(guò)慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測(cè)。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過(guò)程中定期(一個(gè)月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過(guò)程中每天都加藥。