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DMEM/F12(CellCook cat:CM2012,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:2傳代（培養(yǎng)面積比）；3-4天傳1次先收集懸浮型細胞，再對貼壁型 細胞進行消化，收集

消化1-2分鐘

2~3天換液1次

DMEM/F12 +10%FBS+10%DMSO

該細胞系來源于1970年建立的一神經母細胞瘤患者的轉移骨瘤灶細胞
SK-N-SH經三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細胞
顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。SH-SY5Y細胞的生長密度可高達1X106細
胞/cm2，生長成懸浮和貼壁混合生長，有的聚集成細胞叢。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進細胞基因組，使細胞表
達熒光蛋白，在熒光顯微鏡下可以進行觀察，標記后的細胞非常容易進行追蹤檢
測。由于是用慢病毒轉染的方式，導致細胞熒光表達量的不確定性，為增強細胞熒
光表達量可進行抗性篩選。
熒光株培養(yǎng)條件與野生型細胞一致。正常培養(yǎng)過程中定期（一個月2-3次或頻
率自定）用終濃度4μg/mL的嘌呤霉素追加篩選，凍存后復蘇也建議可以追加篩選
一次，不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。