商品詳情
【培養(yǎng)條件】
DMEM,high glucose(CellCook cat:CM2016,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別) 添加劑:0.5mg/ml G418(CellCook cat:CM1023) 0.5mg/ml潮霉素B
【推薦培養(yǎng)試劑】
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
DMEM,high glucose(CellCook cat:CM2016或同配方)
血清:
南美胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
添加劑:
0.5mg/ml G418(CellCook cat:CM1023) 0.5mg/ml潮霉素B
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC90103M)
【傳代比例】
1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化2-3分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
DMEM,high glucose+10%FBS+ 0.5mg/ml G418+0.5mg/ml潮霉素B+10%DMSO
【難度等級(jí)】
+
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
具體的上清收集步驟請(qǐng)參考ATCC網(wǎng)站
【特征特性】
該細(xì)胞是用R- spondin 3和noggin共表達(dá)載體轉(zhuǎn)染L-Wnt3A(ATCC CRL-2647)而獲得,并在含有G418和潮霉素B的培養(yǎng)基中選擇的穩(wěn)定表達(dá)克隆。L-WRN細(xì)胞向培養(yǎng)基中分泌Wnt3A、R-spondin 3和noggin因子。Wnt3A結(jié)合卷曲基因受體家族并激活β-連環(huán)蛋白依賴性轉(zhuǎn)錄。r-spondin蛋白家族的成員是腸道中典型Wnt信號(hào)的有效共激活劑,對(duì)分離小腸干細(xì)胞至關(guān)重要。Noggin是一種骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)信號(hào)抑制劑,能夠在體外維持和使小腸類器官傳代。盡管這三種因子