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細(xì)胞學(xué)堂|人肝癌細(xì)胞系
發(fā)布日期:2022.09.13

 

肝癌是指發(fā)生于肝臟的腫瘤,包括兩大類,一種是原發(fā)性的肝癌,一種是繼發(fā)性的肝癌。原發(fā)性的肝癌指的是起源于肝臟本身的腫瘤。繼發(fā)性肝癌是指其它部位的腫瘤轉(zhuǎn)移到肝癌,比如說結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌的肝轉(zhuǎn)移就是繼發(fā)性的肝癌。原發(fā)性肝癌包括三大類,一種是肝細(xì)胞性的肝癌;一種是膽管細(xì)胞來源的肝癌;還有一部分是其它的間葉組織來源的腫瘤。在中國,原發(fā)性肝癌主要是肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)。

 

人肝癌細(xì)胞系來源于確診肝癌患者的病理組織,廣泛應(yīng)用于各類肝癌的研究,我司已有的常見的人肝癌細(xì)胞系有HepG2、HepG2.2.15、Hep3B、Huh7、Hep3B、SNU-449、SNU-398、SNU182、MHCC97-H、MHCC97-L、MHCC-LM3、PLC/PRF/5和Li-7等。人肝癌細(xì)胞系相較于人原代肝細(xì)胞,具有相似的遺傳和生長特性,同時克服了人原代肝細(xì)胞來源困難、實驗難控制、存活時間短的局限,能夠無限制傳代,易于獲得,是用于肝癌疾病相關(guān)研究的理想對象。

 

接下來給大家介紹幾株被廣泛應(yīng)用于肝癌研究的明星細(xì)胞株:

 

 

01
HepG2
 

 

(1)1979年,從阿根廷一名15歲少年的原發(fā)性肝胚細(xì)胞瘤中分離出并建立;

(2)呈上皮樣、聚團(tuán)貼壁生長,高度分化,倍增時間約50~60h;培養(yǎng)條件為:MEM(Gibco cat:11095,或同配方)+10%FBS+1X非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L);

(3)低轉(zhuǎn)移,裸鼠中成瘤率較差;常被用于體外肝細(xì)胞代謝或遺傳毒性試驗;

(4)腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白AFP陽性,乙肝表面抗原HBsAg陰性,無乙型肝炎病毒(HBV)基因組;

(5)其衍生株HepG2.2.15是抗HBV新藥開發(fā)的一個良好的體外研究工具。該細(xì)胞株是用2個頭尾相連的HBV-DNA全基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染受體細(xì)胞HepG2而成,可在體外無性繁殖,能夠長期穩(wěn)定的向培養(yǎng)上清中分泌HBsAg、HBeAg和完整的Dane顆粒,而且還能產(chǎn)生大量的復(fù)制中間體,是體外篩選抗HBV藥物的良好模型。

 

近期高分文獻(xiàn)分享
 
 

Chan, Jia Jia et al. “Pan-cancer pervasive upregulation of 3' UTR splicing drives tumourigenesis.” Nature cell biology vol. 24,6 (2022): 928-939. doi:10.1038/s41556-022-00913-z

 

1、在文章中,研究人員發(fā)現(xiàn)3’UTR剪接廣泛存在,在癌癥中上調(diào),與不良預(yù)后相關(guān),在癌基因中更為普遍。同時還證明了關(guān)鍵癌基因CTNNB1的剪接3’UTR的生理、功能和臨床相關(guān)性。研究團(tuán)隊驗證了其在肝細(xì)胞癌和結(jié)腸癌中的上調(diào),并表明剪接的3’UTR變體是其致癌功能的主要貢獻(xiàn)者。總之,這項研究強調(diào)了3’UTR剪接在癌癥中的重要性,并可能為基于RNA的抗癌治療開辟新途徑。

2、此研究中選擇了HepG2、Hep3B和SNU398進(jìn)行肝細(xì)胞癌相關(guān)的分析。

 

 

 

02
Huh-7
 

 

(1)1982年,從一名患有肝癌的57歲日本男性肝癌組織標(biāo)本上培養(yǎng)分離得到;

(2)呈上皮樣、貼壁生長,高度分化,倍增時間約為48小時;培養(yǎng)條件為:DMEM(改良型)(CellCook cat:CM2007)+10%胎牛血清;  

(3)HBV陰性,AFP陽性,丙型肝炎病毒(HCV)易感;

(4)可用于HCV與肝癌的關(guān)系的研究、基因表達(dá)的調(diào)節(jié)機制、新陳代謝及VLDL的分泌等。

 

 

近期高分文獻(xiàn)分享
 
 

Morgenstern, Marcel et al. “Quantitative high-confidence human mitochondrial proteome and its dynamics in cellular context.” Cell metabolism vol. 33,12 (2021): 2464-2483.e18. doi:10.1016/j.cmet.2021.11.001

 

1、本文獻(xiàn)中,研究人員采用多維分類方法,定義了1,134個蛋白質(zhì)編碼基因的MitoCoP。MitoCoP代表了一個全面的蛋白質(zhì)組,具有線粒體特異性的絕對豐度和周轉(zhuǎn)值,為表征線粒體生物發(fā)生、功能和健康和疾病中的動態(tài)提供了豐富的信息。MitoCoP為定義迄今尚未探索的與人類健康和疾病相關(guān)的線粒體調(diào)控成分和途徑開辟了一個廣闊的領(lǐng)域。

2、此文獻(xiàn)中對多種疾病細(xì)胞進(jìn)行了分析,其中肝細(xì)胞癌相關(guān)細(xì)胞系包含了Huh-7。

 

 

 

03
MHCC97及相關(guān)細(xì)胞系
 

 

(1)MHCC97細(xì)胞系,于1998年由上海醫(yī)科大學(xué)中山醫(yī)院建立, 將一名我國39歲男性HCC患者的肝右葉轉(zhuǎn)移病灶的手術(shù)切除標(biāo)本接種于裸鼠肝內(nèi)建造出人肝癌裸鼠轉(zhuǎn)移模型(LCI-D20)而得。

(2)呈上皮樣、貼壁生長,HBsAg、AFP高表達(dá),成瘤率高且優(yōu)先轉(zhuǎn)移的靶器官是肺,肺轉(zhuǎn)移率100%,故證實該細(xì)胞系為高轉(zhuǎn)移特性的人肝癌細(xì)胞系。

 

 

(3)2001年,研究者從MHCC97細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)并分離出不同轉(zhuǎn)移潛能的2個細(xì)胞系MHCC97-H和MHCC97-L,前者肺轉(zhuǎn)移率100%,后者40%;從生長速度上,前者細(xì)胞倍增時間較后者短;穿透人工基底膜能力前者較后者大;前者均較后者活力強、代謝旺。傳代至20代后,兩種形態(tài)學(xué)特征及生長速度方面均較穩(wěn)定。之后又從MHCC97-H裸鼠接種后成功得到更高轉(zhuǎn)移潛能的HCCLM3細(xì)胞系。

(4)MHCC97相關(guān)細(xì)胞系的培養(yǎng)條件為:DMEM,high glucose(Gibco cat:11995,或同配方)+10%胎牛血清

 

 

 

 

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