空泡化的原因有哪些？能說(shuō)明細(xì)胞狀態(tài)差嗎？
細(xì)胞空泡如圖所示1
細(xì)胞空泡化是什么？
細(xì)胞質(zhì)空泡化（cytoplasmic vacuolization）是2019年公布的感染病學(xué)名詞。變性細(xì)胞的胞質(zhì)、胞核內(nèi)出現(xiàn)大小不一的空泡(水泡)，細(xì)胞呈蜂窩狀或網(wǎng)狀。變性嚴(yán)重的細(xì)胞，胞質(zhì)內(nèi)小空泡相互融合成大空泡，細(xì)胞核懸于中央，或被擠于一側(cè)，細(xì)胞形體顯著腫大，胞質(zhì)空白，外形如氣球狀。
胞質(zhì)空泡化可以是可逆的，也可以是不可逆的?？赡娴陌|(zhì)空泡化通常只是在暴露于誘導(dǎo)劑后能觀察到，這種胞質(zhì)空泡化可以引起細(xì)胞狀態(tài)的改變或者細(xì)胞周期停滯。而不可逆的胞質(zhì)空泡化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，許多自然或者人工合成的化合物以及被細(xì)菌或者病毒感染后均會(huì)出現(xiàn)不可逆的胞質(zhì)空泡化，因此出現(xiàn)這種情況，細(xì)胞便不可再用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中。
細(xì)胞空泡如圖所示2
細(xì)胞空泡如圖所示3
細(xì)胞空泡如圖所示4
細(xì)胞空泡如圖所示5
細(xì)胞空泡化的原因有哪些？
原代細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中，隨著傳代次數(shù)的增加，部分細(xì)胞進(jìn)入終末分化狀態(tài)，喪失分裂能力，隨之空泡化而死亡；永生化的細(xì)胞系，當(dāng)細(xì)胞傳代次數(shù)過(guò)多時(shí)，也會(huì)出現(xiàn)老化的現(xiàn)象。
當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)基滲透壓或pH改變，或培養(yǎng)基的pH值與細(xì)胞正常所需pH值差別太大等情況時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)收到刺激，容易發(fā)生空泡化。
當(dāng)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷；或者在消化過(guò)程中，過(guò)度吹打、吹打時(shí)產(chǎn)生大量氣泡，都容易誘發(fā)細(xì)胞空泡的產(chǎn)生。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，血清質(zhì)量/濃度、藥物或外界刺激等均可導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，從而產(chǎn)生空泡。
當(dāng)細(xì)胞缺乏營(yíng)養(yǎng)處于饑餓狀態(tài)，也會(huì)自噬從而產(chǎn)生空泡，但是自噬小體僅能在電鏡下觀察到。
支原體嚴(yán)重污染時(shí)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)變差，空泡化，細(xì)胞膜上也會(huì)出現(xiàn)小黑點(diǎn)附著；病毒感染也可能會(huì)導(dǎo)致空泡的產(chǎn)生。
那遇到細(xì)胞空泡化我們應(yīng)該如何解決？
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細(xì)胞老化，可以通過(guò)復(fù)蘇代數(shù)靠前的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。
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培養(yǎng)基滲透壓及pH值，可以通過(guò)更換合適的培養(yǎng)基，調(diào)整到合適的滲透壓及pH值，再進(jìn)行培養(yǎng)。
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在傳代時(shí)，要選用合適濃度的胰酶和選取適當(dāng)?shù)南瘯r(shí)間進(jìn)行消化，在操作時(shí)要避免吹打過(guò)度產(chǎn)生大量氣泡。
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要保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)充足，可以通過(guò)增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決。
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盡量使用質(zhì)量好和渠道正規(guī)的胎牛血清，因?yàn)檫@樣的血清營(yíng)養(yǎng)豐富且外源刺激因子少，可以有效地避免出現(xiàn)這類(lèi)問(wèn)題。
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在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，注意操作規(guī)范，減少污染。定期檢測(cè)細(xì)胞是否存在支原體污染的情況，如果存在支原體污染需及時(shí)清除，避免影響細(xì)胞狀態(tài)。
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