圖1：ATCC中BEAS-2B的細(xì)胞形態(tài)
BEAS-2B細(xì)胞從一位非癌個(gè)體的正常人支氣管上皮病理切片分離，經(jīng)過腺病毒12-SV40雜交病毒感染并篩選克隆建成永生化細(xì)胞系。BEAS-2B細(xì)胞保留了對(duì)血清反應(yīng)進(jìn)行鱗狀分化的能力，并用于篩選誘導(dǎo)或影響分化及致癌的化學(xué)或生物制劑。PS：細(xì)胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。
本文為大家介紹BEAS-2B的
培養(yǎng)條件及注意事項(xiàng)
圖2：BEAS-2B的細(xì)胞形態(tài)
★ 形態(tài)特征：上皮細(xì)胞樣
★ 培養(yǎng)條件：BEGM培養(yǎng)基
★ 傳代比例：1:4傳代（培養(yǎng)面積比）,推薦初始密度為1500-3000細(xì)胞/CM2，在細(xì)胞完全匯合前傳代，防止細(xì)胞鱗狀分化。傳代時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制密度，最少不能低于60%，最高不超過80%。
★ 傳代方式：胰酶（0.25%Typsin+0.53 mM EDTA +0.5%POLYVINYLPYR-ROLIDONE (PVP)）消化2分鐘
使用無血清培養(yǎng)基BEGM培養(yǎng)，效期2個(gè)月。
終止消化時(shí)，用1mL胰蛋白酶抑制劑（2.5mg/ mL）終止，離心去上清，然后用3mL PBS再次清洗細(xì)胞，離心收集后，用新的培養(yǎng)基重懸后鋪板（消化過程中，不要拍瓶身，振蕩可促使細(xì)胞聚團(tuán)。）
注意：80%左右匯合度時(shí)傳代，完全匯合會(huì)使細(xì)胞末端分化。
剛復(fù)蘇要使用提前用包被液包被過的培養(yǎng)器皿（包被液配方：0.01mg/mL 黏連蛋白、0.03 mg/mLⅠ型膠原和0.01mg/mL BSA），以增加細(xì)胞貼附。培養(yǎng)器皿提前使用包被液處理，包被時(shí)間至少4小時(shí)，建議過夜。
用不含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)，BEAS-2B細(xì)胞具有典型的呼吸上皮細(xì)胞多邊形態(tài)；用含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)，密度低時(shí)細(xì)胞形態(tài)會(huì)呈長(zhǎng)梭型，但密度高一些以后形態(tài)會(huì)變短。
圖3源來自文獻(xiàn)
▲ 通過比較有/無FBS培養(yǎng)的BEAS-2B的全基因組基因表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)部分生物途徑發(fā)生了基因表達(dá)變化，主要包括致癌和能量代謝有關(guān)的途徑。
▲ 實(shí)驗(yàn)實(shí)時(shí)測(cè)量BEAS-2B的氧消耗和糖酵解，發(fā)現(xiàn)FBS培養(yǎng)的細(xì)胞總糖酵解能力增加了1.4倍，基礎(chǔ)呼吸增加了1.9倍，產(chǎn)生ATP所消耗的氧氣增加了2.0倍；與不使用FBS培養(yǎng)的BEAS-2B相比，最大呼吸量增加了2.8倍。
▲ 43%的亞砷酸鹽調(diào)節(jié)基因在mRNA水平上受到胎牛血清的調(diào)節(jié)。
▲ 細(xì)胞毒性研究顯示，暴露在5%的FBS中8周的BEAS-2B細(xì)胞對(duì)亞砷酸鹽的細(xì)胞毒性的敏感性幾乎是不接觸FBS的BEAS-2B細(xì)胞的5倍。
▲ 胎牛血清誘導(dǎo)的BEAS-2B的表型變化表明，在使用BEAS-2B作為砷毒性的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜁r(shí) ，應(yīng)仔細(xì)考慮培養(yǎng)條件。
DOI:10.1002/jat.3094
[2]Li T, Liu Y, Xu W, et al. Polydatin mediates Parkin-dependent mitophagy and protects against mitochondria-dependent apoptosis in acute respiratory distress syndrome[J]. Laboratory Investigation, 2019, 99(6): 819-829.
DOI:10.1038/s41374-019-0191-3
(此文獻(xiàn)Beas-2B細(xì)胞購自賽庫生物）
[3]Tan H W, Liang Z, Yao Y, et al. Lasting DNA Damage and Aberrant DNA Repair Gene Expression Profile Are Associated with Post-Chronic Cadmium Exposure in Human Bronchial Epithelial Cells[J]. Cells, 2019, 8(8).
DOI:10.3390/cells8080842
(此文獻(xiàn)Beas-2B細(xì)胞購自賽庫生物）
[4]Li X, Jia Y, Nan A, et al. CircRNA104250 and lncRNAuc001.dgp.1 promote the PM2.5-induced inflammatory response by co-targeting miR-3607-5p in BEAS-2B cells[J]. Environmental Pollution, 2020.
DOI:10.1016/j.envpol.2019.113749
(此文獻(xiàn)Beas-2B細(xì)胞購自賽庫生物）
[5] Jia Y , Li X , Nan A , et al. Circular RNA 406961 interacts with ILF2 to regulate PM2.5-induced inflammatory responses in human bronchial epithelial cells via activation of STAT3/JNK pathways[J]. Environment International, 2020, 141:105755.
DOI:10.1016/j.envint.2020.105755
(此文獻(xiàn)Beas-2B細(xì)胞購自賽庫生物）
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