收到T25活細(xì)胞時(shí)，如何操作？
? 寄送過程中，為避免細(xì)胞脫落死亡，T25瓶為灌液狀態(tài)出庫寄送。收到細(xì)胞請檢查培養(yǎng)瓶外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即聯(lián)系我們。
? 將原封的T25 瓶用酒精擦拭后轉(zhuǎn)移置37 °C， 5%CO2培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至37 °C，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞再附著生長。穩(wěn)定2-4小時(shí)后，于生物安全柜/超凈臺內(nèi)操作：吸出全部灌液培養(yǎng)基，更換新鮮的完全培養(yǎng)基換液處理，或細(xì)胞已長滿，則將細(xì)胞做1：2傳代培養(yǎng)。
收到細(xì)胞凍存株時(shí)，如何操作？
? 收到細(xì)胞株包裹時(shí)，請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍、漏液等情況，若有請立即聯(lián)系我們。
? 細(xì)胞株請盡快復(fù)蘇培養(yǎng)，或及時(shí)轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
接收常見問題
剛接收細(xì)胞大量漂浮成團(tuán)怎么辦？
一些本身貼壁比較松散的細(xì)胞比如293T細(xì)胞，收到活細(xì)胞時(shí)有可能大部分細(xì)胞脫離培養(yǎng)瓶壁漂浮起來，顯微鏡下找不到細(xì)胞，只能看到肉眼可見的細(xì)胞團(tuán)，是正?，F(xiàn)象。
處理方法
參照以下方式處理即可恢復(fù)正常：
收到細(xì)胞后請先置于培養(yǎng)箱中穩(wěn)定2~4h后再進(jìn)行下一步處理，不建議放置培養(yǎng)箱過夜后處理；
將培養(yǎng)瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入50mL離心管，1000rpm離心5min收集漂浮的細(xì)胞；
去掉上清，加入1mL左右0.25%胰酶（含EDTA，無鈣鎂離子）重懸細(xì)胞輕輕吹散至沒有大細(xì)胞團(tuán)，放入培養(yǎng)箱消化1min左右；
貼壁部分的細(xì)胞采用常規(guī)的消化流程即可；
消化1min（懸?。?2-3min（貼壁）后，加入2mL完全培養(yǎng)基混勻終止消化，用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞團(tuán)分散成單細(xì)胞，將所有細(xì)胞收集到一起1000rpm離心5min；
去掉上清，加入完全培養(yǎng)基混勻，視細(xì)胞量決定是1:2傳代還是1:3傳代（由于細(xì)胞運(yùn)輸有損傷，首次傳代建議比平時(shí)養(yǎng)密度稍高）；
顯微鏡下觀察細(xì)胞是否有分散成單細(xì)胞現(xiàn)象，若有明顯很大的細(xì)胞團(tuán)需要重復(fù)上述步驟二次消化；
第二天及時(shí)觀察細(xì)胞貼壁情況，若貼壁細(xì)胞量過多，造成細(xì)胞堆積，貼壁24h后再次傳代分瓶，若密度正常則繼續(xù)生長，不建議換液，貼壁48h后再換液去掉不能貼壁的細(xì)胞。
?
收貨處理后，細(xì)胞不貼壁
很多細(xì)胞在接收傳代后可能會出現(xiàn)細(xì)胞成團(tuán)漂浮、不貼壁的情況，例如RAW 264.7細(xì)胞會經(jīng)常出現(xiàn)這種情況，不用擔(dān)心，處理一下即可恢復(fù)。
處理方法
參照以下方式處理即可恢復(fù)正常：
把細(xì)胞收集離心，用1mL完全培養(yǎng)基重懸，慢慢地，輕輕地吹打，直到細(xì)胞被吹成單細(xì)胞，重新鋪板。
RAW 264.7脫落后傾向于抱團(tuán)，抱團(tuán)時(shí)細(xì)胞是活著的，但很難貼壁。
一定要把聚成團(tuán)的細(xì)胞吹散成單細(xì)胞，不然細(xì)胞很難重新貼壁。
收貨處理后，小部分細(xì)胞漂浮怎么辦？
受運(yùn)輸影響一些細(xì)胞可能會漂浮，放入培養(yǎng)箱穩(wěn)定后可重新貼壁，若穩(wěn)定后還有極少量細(xì)胞不貼壁可直接換液丟棄。
銷售咨詢
技術(shù)支持
