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一、真菌概述
真菌是一類具真核和細胞壁的異養(yǎng)生物。真菌可以通過孢子延續(xù)種群,典型的營養(yǎng)體為絲狀分支結構。可污染細胞培養(yǎng)基的真菌種類繁多,最常見的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。
二、真菌污染
真菌污染是細胞培養(yǎng)過程中最常見的另一種污染,尤其在梅雨季節(jié),霉菌污染尤為嚴重。另外由于真菌可以通過孢子繁殖,因此一旦污染很容易發(fā)生擴散。常見的真菌感染有煙曲霉菌、黑曲霉菌、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌污染等。
特點
1
真菌污染的細胞培養(yǎng)基短期內一般不會渾濁,可在培養(yǎng)液表面形成白色或黃色漂浮物(斑點狀,易于觀察);
2
高倍鏡下可見明顯的絲狀、管狀或是樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞間;
3
念珠菌和酵母菌污染一般會成卵圓形散在細胞周邊,并且酵母菌污染會導致培養(yǎng)液渾濁。
4
真菌污染會與細胞搶奪營養(yǎng),還會釋放次級代謝物毒害細胞,造成細胞活力變差,生長速度變慢,甚至死亡。
酵母污染
鏡下可以看到典型的出芽形態(tài)
真菌污染防治方法
如果細胞被真菌污染,建議丟棄,重新復蘇,以防污染其他細胞。
如果細胞很珍貴,可使用兩性霉素B或者300ug/mL的氟康唑處理。
注意
1
發(fā)生真菌污染后,將其他細胞移出培養(yǎng)箱,用微量硫酸銅溶液擦拭培養(yǎng)箱,再把水盤里加適量硫酸銅或者磷酸氫二鈉高鹽液體。
2
細胞培養(yǎng)箱應定期清潔,大約一個月左右清潔一次。
3
最主要的還是要培養(yǎng)良好的無菌觀念,實驗室盡量不要大聲說話,佩戴好口罩,手套,操作時應小心,避免培養(yǎng)基撒入培養(yǎng)箱以及生物安全柜,這些撒入培養(yǎng)箱的培養(yǎng)基為細菌及真菌的繁殖提供了很好的條件。